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ZETA LIFE細胞增殖及毒性檢測 CCK8試劑盒簡介
更新時間:2021-11-24   點擊次數:3007次

ZETA LIFE細胞增殖及毒性檢測-Cell Counting Kit(CCK試劑盒)

價格:¥615 - 2800

品牌:ZETA LIFE .

貨號:K009

產地:USA

數量:1000

英文名:cck8

保質期:24 months

保存條件:4°C避光保存

規格:500T-3000T

 

CellCounting Kit簡稱CCK試劑盒,是一種基于WST (水溶性四唑鹽,化學名: 2- (2-甲氧基-4-硝苯基) -3- (4-硝苯基) -5-(2,4-二磺基苯) -2H四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

                                             

 

CCKMTT的一種升級替代產品,和MTT或其他MTT類似產品如XTT. MTS等相比有明顯的優點:

-CCK被線粒體內的脫氫酶還原成的formazan是水溶性,不需要有特定的溶解液來溶解,而WSTXTTMTS產生的formazan都不是水溶性的,因而可以省去后續溶解步驟。

-CCKXTTMTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。

-CCKMTTXTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。

 

 

操作說明:

一、制作標準曲線(測定細胞具體數 量時)

1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量,然后接種細胞。

2、按比例(例如: 1/2比例)依次用培養基等比稀釋成-一個細胞濃度梯度,一般要做3-5個細胞濃度梯度, 每組3-6個復孔。

3、接種后培養2- 4小時使細胞貼壁,然后加CCK試劑培養-定時間后測定OD值, 制作出一條以細胞數量為橫坐標(X),

OD值為縱坐標(Y)的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量(試用此標準曲線的前提是實驗的條件要一

致,便于確定細胞的接種數量以及加入CCK后的培養時間)

二、 細胞活性檢測

1、在96孔板中接種細胞懸液(100ul)。將培養板放在培養箱中預培養(379C, 5% CO2的條件下)

2、向每孔加入110ulCCK 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)

3、將培養板在培養箱內孵育14小時。

4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

5、如果暫時不測定OD值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10ul 0. 1MHCL溶液或者1% wIv SDS溶液,并遮蓋培養

板避光保存在室溫條件下。在24小時內吸光度不會發生變化。

三、細胞增值~毒性檢測

1、在96孔板中配置100u的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時(379C5% CO2的條件下)

2、向培養板加入10ul不同濃度的待測物質。

3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間(例如: 6 122448小時)

4、想每孔加入10ul CCK溶液(注意不要再孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)

5、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

6、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

7、如果暫時不測定OD值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10ul 0. 1MHCL溶液或者1% wIv SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在24小時內吸光度不會發生變化。

注意:如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK之前更換新鮮培養基(除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養基),去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。

 

保存條件:

49C避光保存,有效期一年。

溫聲提示:不可用于臨床治療。

 

 

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